
大蛇丸は、木ノ葉隠れの里の伝説の三忍の一人であり、世界中のすべての秘密を極めたいという渇望から不老不死を求めるようになった天才である。生身の人間に対する禁じられた人体実験により里から逃亡を余儀なくされ、長年にわたり里の破滅を企てていたが、自らの手法が自分に跳ね返ってくるのを目の当たりにしたことで、彼の研究は命を歪めることから命を創造することへと向かっていった。
大蛇丸のすべてが蛇を連想させる。彼の肌はほとんど白く、歯は牙のように尖っており、鋭く切り立った頬骨の上には、縦長の瞳孔を持つ金色の目が紫色の模様で縁取られている。真っ直ぐな黒髪は腰に達し、顔の周りに垂れており、後に彼が奪うすべての体は、主に身長が異なる程度で、この本来の姿を反映するように作り変えられる。Naruto Gaidenの頃には、彼の容貌は中性的なものへと柔和になり、目の周りの模様は黒くなり、髪はポニーテールにまとめられ、顔色はさらに青白くなっている。
普段は黒いトップスの上にゆったりとしたベージュの着物を羽織り、腰の低い位置で太い紫色の縄帯を結び、青い勾玉のイヤリングをつけている。暁の時代には、グループの赤雲の衣を纏い、左手に指輪をはめていた。果てしない実験によって作り直された彼の真の姿は、無数の小さな蛇から形成された巨大な白蛇である。
綱手を含め、彼を知るほぼすべての人が大蛇丸に対して同じ言葉を思い浮かべる。「歪んでいる」。幼くして両親を亡くしたことで、人間の命の脆さと、死が生きている者をどれほど深く傷つけるかを嫌悪するようになり、そこから決して死なないことへの渇望が生まれた。捕らえた被験者への実験は手段であり、体の限界を試し、他人から有用な力を奪い取るための方法であった。それはすべて、存在するすべての術を学ぶために必要な多くの生涯を送ることができる、不死の「究極の存在」になるための追求であった。
その野心は神気取り、ずさんな仕事に対する完璧主義者の軽蔑、そして出会う人々を怖がらせることへの純粋な喜びを生み出した。彼のカリスマ性は信奉者を引き付けるが、彼は彼らを惜しげもなく使い捨て、都合が良くなれば即座に同盟者を裏切る。四代目風影を殺害してその顔を被り、うちはイタチの体を奪うことに失敗すると暁を見捨てた。彼の最も深い欠点は傲慢さである。自身の無敵を確信し、ヒルゼンやイタチに無謀に挑み、二度とも不具にされた。少年の体と写輪眼を奪うつもりでうちはサスケを弟子にしたが、その執着は時間とともに腐り果てていった。
サスケが彼を復活させた後、何かが変化する。薬師カブトが自分をそっくりそのまま真似るのを見て模倣の愚かさを学び、戦争を無視するのではなく、若いうちはの傍らで戦うことを選び、綱手や他の影たちを治療する。晩年にはより穏やかな手段で生命の秘密を追求し、自分の里を再建し、木ノ葉の指導部との関係を修復し、合成して造り出した息子のミツキを木ノ葉へ送り出し、少年が自分自身の選択によって成長することを望んでいる。
孤児として育った大蛇丸は、自来也や綱手と共に猿飛ヒルゼンのもとで修行し、一世代に一度の天才として頭角を現した。両親の墓の近くで見つけた再生を象徴すると言われる白蛇が、彼を生涯にわたる生命の神秘の探求へと導いた。第二次忍界大戦中に3人が半蔵との激突を生き延びて三忍と名付けられた後、彼は木ノ葉で昇進し、最終的には志村ダンゾウの下で「根」の部門に仕えた。そこで彼の研究は人体実験へと暗転した。木遁を再現しようと何十人もの誘拐された子供たちに千手柱間の細胞を移植したが、そのうちの一人、ヤマトが生き延びたことには気づいていなかった。
また、彼は禁術である穢土転生を学び、やがて不屍転生を完成させた。これは数年ごとに新しい宿主に魂を移植することで、寿命を無限に延ばすことができる体を乗っ取る術である。力を求める彼の探求は龍地洞へと続き、そこで仙術を習得したが、仙人モードに入ることができず、そのエネルギーを彼特有の呪印に注ぎ込んだ。最終的にヒルゼンが実験中の彼を捕らえたが、自分の弟子を殺すことができず、大蛇丸は逃亡して暁に流れ着き、サソリとコンビを組んだ。うちはイタチの体を奪おうとした結果、彼は片手と組織内での居場所を失い、その後、独自の隠れ里である音隠れの里を創設した。
中忍試験中、彼はうちはサスケに呪印を刻み、その後の木ノ葉崩しでは、過去の火影を穢土転生させてヒルゼンを殺害したが、三代目は死に際に彼の両腕を封印した。戦闘において、大蛇丸は伸縮する草薙の剣を振るい、巨大なマンダに至るまでの蛇を操り、八つの頭を持つ八岐の術に変化し、陰陽に加えてすべての基本性質を呼び出すことができる。第二部でサスケに殺害されたが、後にカブトの肉体から再生され、両腕の封印を解き、最初の4人の火影を復活させて第四次忍界大戦で戦わせた。その数年後、彼は木ノ葉の用心深い同盟者として改心し、人工的に造られた息子のミツキを育てる。
大蛇丸はもともと禁断の人体実験と不老不死を追い求めて木ノ葉隠れの里を離反した悪役だったが、サスケによって蘇生された後は警戒しながらも忍連合軍に加わって戦い、後には自らの里の再建にも力を貸すようになった。
大蛇丸は第二部で自らの弟子であるうちはサスケに殺されたが、その後薬師カブトの肉体から再構築され、物語に復活を果たした。
大蛇丸は結婚したことがなく、息子のミツキは結婚によって生まれたのではなく、自身の実験によって生み出された存在である。
大蛇丸はほぼすべての基本性質変化を操るほか、伸縮自在の草薙の剣を武器とし、巨大な蛇マンダに至るまでの蛇の口寄せを使い、さらに八つの頭を持つ八岐大蛇へと変身することもできる。
大蛇丸は、誘拐した子供たちに千手柱間の細胞を移植して木遁を再現しようとするなど禁断の人体実験を行っているところを猿飛ヒルゼンに見つかり、木ノ葉隠れの里から逃亡した。
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