サクラの容姿には兄の面影がほとんど見られない。色白の肌に茶色の長い髪をなびかせ、黒いベレー帽をかぶり、首元には青いスカーフを結んでいる。ヴィレの組織内において彼女の服装は独創的であり、膝上丈のダークカラーのレギンスの上に、ポケットがひとつ付いたグレーと白のドレスを着用している。
ヴンダーのクルーの中で、サクラだけがシンジに対して礼儀正しく接する。彼女はヴィレの使命に対して心から前向きであり、艦橋からエヴァンゲリオン Mark.04C に対する作戦を見守る際にも胸を躍らせるが、シンジに装着されたDSSチョーカーをはじめとする組織の非情な決断のいくつかには密かに心を痛めている。
シンジに対する彼女の感情は二つの方向に揺れ動いている。エヴァンゲリオンが関わる限り、彼女は彼を世界と彼自身にとっての「不幸をもたらす者」と捉えており、彼のエントリープラグへの搭乗を阻むために銃を向ける覚悟すら決めている。しかしそれでも彼女の決意は揺らぎ、銃を握る手は震え、涙を流しながら引き金を引く際に目を固く閉じる。彼女自身の言葉を借りれば、シンジは救世主と破壊者が同居した存在なのである。兄のトウジと同様、彼女も関西弁で話す。
ヱヴァンゲリヲン新劇場版:序では子供時代に、初号機と第4の使徒との戦闘の煽りを受けて負傷し、兄を苛立たせる長期間の入院生活を余儀なくされる。彼女の退院は3号機が日本に到着する時期と重なり、その日トウジは学校を休んで彼女の付き添いをした。
ニアサードインパクトを生き延びた彼女は、14年後のヱヴァンゲリヲン新劇場版:Qにおいてヴィレの少尉階級を持つ軍医として再登場する。ヴンダーの船内でシンジが目覚めると、彼の経過観察を行い、葛城ミサトと対面させるために甲板へ同行させ、その後保護室へと案内して自己紹介をする。この会話によってシンジはどれほどの時間が経過したかを悟ることになる。彼の拘禁中、彼女だけが優しさをもって接し、彼がMark.09に乗って連れ去られる前に、二度とエヴァに乗らないよう懇願する。
シン・エヴァンゲリオン劇場版では、帰還したシンジを涙と平手打ち、そして「あれほど乗るなと言ったのに」という激しい説教で出迎える。彼女はアスカとともに彼の身柄引き渡し書類に署名し、今回はチョーカーなしで第2保護室での経過観察を手配する。また、第3村からの記録とともに、家族写真と愛情のこもったメッセージが添えられたトウジからの手紙を受け取り、涙を流す。ヤマト作戦中には医務室で勤務していたが、シンジがマイナス宇宙へゲンドウを追う決意を固めると、北上ミドリとともに拳銃を抜き、彼が操縦席に座れない程度の怪我を負わせる目的で足元に向けて発砲する。ミサトが次の遮断線に割り込んで腹部に被弾し、ミドリの威嚇射撃によってサクラはようやく銃を置く。彼女は死にゆく艦長の応急処置を行い、ガイウスの槍を精錬するために艦が捧げられる前に負傷したクルーをヴンダーから軌道突入艇へと誘導し、第3村付近に着陸する脱出用カプセルで生還する。
映画作品以外では、コラボゲーム勝利の女神:NIKKEに登場し、セラフィムの医師メアリーのもとでニッケの治療法を学ぶ。彼女は自分を極限まで追い込んで治療にあたり、元の世界で患者が死んでいく姿(跡形もなく消え去る者もいた)を目撃したことが、救える限りの命を救おうとする原動力になっていると明かす。
鈴原サクラはヴィレ(WILLE)のクルーの中で誰よりも温かく礼儀正しく碇シンジに接し、彼の看護をする際も心から案じています。しかし、彼女はシンジを「救世主と破壊者が同居した存在」と呼び、彼がエヴァンゲリオンに搭乗するたびに恐れを抱くため、その心境は複雑なままです。
鈴原サクラはニアサードインパクトを生き延び、14年後にAAA ヴンダーに乗艦するWILLEの医官として再登場します。目覚めたシンジの看護を担当し、後にヤマト作戦中に彼が再びエヴァに乗り込むのを止めようとしますが、最終的には滅びゆくヴンダーから脱出カプセルで逃れ、第3村の近くに着陸します。
鈴原サクラは少尉の階級を持つWILLEの軍医として勤務し、主計科人型CBRNEA対抗策担当の肩書も持っています。彼女は碇シンジの治療や経過観察を行う姿が最も頻繁に描かれる乗組員です。
鈴原サクラは、シンジのエヴァパイロットの同級生である鈴原トウジの妹です。そのため、彼女は鈴原ヒカリの義理の妹にあたり、二人の娘である鈴原ツバメの叔母となります。
鈴原サクラは北上ミドリとともに拳銃を抜き、碇シンジがゲンドウを追ってマイナス宇宙に向かうのを阻止するため、彼がエヴァンゲリオンのコクピットに乗れなくなる程度に傷つけようとした。しかし葛城ミサトが射線に割り込んで代わりに撃たれ、サクラはミドリが威嚇射撃を行った後になって初めて銃を下ろした。
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